簡要描述:
L半乳糖酸1,4內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測試盒是合成AsA的主要途徑。Gal LDH位于線粒體內(nèi)膜,負責催化植物體內(nèi)AsA生物合成的最后一步,也是該途徑的關(guān)鍵酶之一,對植物體內(nèi)AsA含量的積累起著至關(guān)重要的作用。
更新時間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1027
商品詳情:
L半乳糖酸1,4內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測試盒測定意義:
L-半乳糖途徑是合成AsA的主要途徑。Gal LDH位于線粒體內(nèi)膜,負責催化植物體內(nèi)AsA生物合成的最后一步,也是該途徑的關(guān)鍵酶之一,對植物體內(nèi)AsA含量的積累起著至關(guān)重要的作用。
貨號 | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3223 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3223-1 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 |
測定原理:
Gal LDH催化L-半乳糖內(nèi)酯還原細bao色素C(Cyt c),還原型Cyt c在550nm有吸收峰;測定還原型Cyt c增加速率,來計算Gal LDH活性。
自備儀器和用品:
臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提?。?/span>
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
計算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細菌或細胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細菌或細胞總數(shù),2000萬。
注意事項:
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實驗結(jié)果的準確性,需先取1-2個樣做預(yù)實驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
半抑制劑7ELISA試劑盒 CST7免費代測試劑
半抑制劑6ELISA試劑盒 CST6免費代測試劑
半抑制劑5ELISA試劑盒 CST5免費代測試劑
半抑制劑4ELISA試劑盒 CST4免費代測試劑
半抑制劑2ELISA試劑盒 CST2免費代測試劑
半抑制劑11ELISA試劑盒 CST11免費代測試劑
半抑制劑1ELISA試劑盒 CST1免費代測試劑
斑聯(lián)蛋白ELISA試劑盒 ZYX免費代測試劑
白細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子1ELISA試劑盒 LST1免費代測試劑
白細胞免疫球蛋白樣受體亞家族A成員3ELISA試劑盒 LILRA3免費代測試劑
白細胞關(guān)聯(lián)免疫球蛋白樣受體2ELISA試劑盒 LAIR2免費代測試劑
白細胞關(guān)聯(lián)免疫球蛋白樣受體1ELISA試劑盒 LAIR1免費代測試劑
白三烯A4ELISA試劑盒 LTA4免費代測試劑
白介su9受體ELISA試劑盒 IL9R免費代測試劑
白介su4誘導(dǎo)蛋白1ELISA試劑盒 IL4I1免費代測試劑
L半乳糖酸1,4內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測試盒轉(zhuǎn)氫酶-2測試盒/微量法100管/96樣
總氨基(T-AA)測試盒/比色法80管/78樣
總超氧化物歧化酶(SOD)測試盒/WST-1法48T
總超氧化物歧化酶(SOD)測試盒/WST-1法96T
總超氧化物歧化酶(T-SOD)測試盒/羥胺法50管/48樣
總超氧化物歧化酶(T-SOD)測試盒/羥胺法100管/96樣
總(TC)含量測試盒/分光光度法50管/48樣
總(TC)含量測試盒/微量法100T/96S
總蛋白(TP)測試盒/考馬斯亮藍法100管/96樣