ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠使用指南------ 步驟、常見問題、解決方案、實驗準(zhǔn)備
1、 加樣器不確;尤其10ul以下的加樣器,對結(jié)果影響極大;
2、 保溫設(shè)備不良;
3 、洗滌用水不規(guī)范。 (1) 校正加樣器;10ul以下加樣器采用進(jìn)口產(chǎn)品(芬蘭、法國等); (2) 仔細(xì)校正溫度到37℃,水浴箱為佳; (3) 必須使用去離子水或蒸餾水,不得用自來水、礦泉水等。
4、 認(rèn)真閱讀使用說明書。 樣品加樣 (1) 加樣不準(zhǔn)確; (2) 沒有混勻。 加樣時一定要仔細(xì)。加樣后,再檢查,以防漏加、錯加。加樣后,反復(fù)抽吸3次混勻,防止血清聚集孔底,導(dǎo)致非特異性吸附。洗滌 洗滌不* ,每次注水洗滌,應(yīng)靜止30秒鐘;選用吸水紙作為襯墊,每次洗滌后扣干孔內(nèi)水分;可選用塑料洗滌瓶。 加酶反應(yīng) 漏加 滴加后,認(rèn)真檢查各孔。
5、結(jié)果判斷 (1) 包括陰性對照孔在內(nèi),各孔顯色普遍偏深; (2) 包括陽性對照在內(nèi),各孔均無顯色; (3) 陽性對照不顯色,而其它樣本顯色正常; (4) 有些標(biāo)本顯色不深,判斷陽性困難??赡苁窍礈觳怀浞?;加樣過量;溫育時間過長溫度過高;按說明書重新操作。如無改善, 可與; 如果是漏加樣本或酶液;溫育時間過短溫度過低;試劑保存不當(dāng)活性下降;按說明書重新 操作。如無改善,可與; 陽性對照漏加、錯加或失效。重新操作。如無改善,可與,索要對照品; 重新操作。使用酶標(biāo)儀,測定光吸收度,按P/N值標(biāo)準(zhǔn)判斷。
6、ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠保存 保存不規(guī)范 一定要在2-8℃存放。不得過高,也不得凍存(凍存后,酶液將失效)。 對照品 對照品為凍干品 按對照管標(biāo)示,加入相應(yīng)體積的去離子水或蒸餾水復(fù)溶,充分溶解混勻。可按說明書使用。
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